等温扩增荧光检测仪是一种用于核酸快速检测的设备，以下是其详细的使用细节：

　　一、准备工作

　　1. 环境准备：应在洁净的环境中进行操作，如生物安全柜，以减少外界污染对实验结果的影响。同时，要确保操作台面清洁，无灰尘、杂物等。

　　2. 试剂与耗材准备：准备好检测所需的试剂盒，包括扩增反应预混液、引物探针等，以及阳性对照、阴性对照和内标(如果需要)。还需准备兼容的反应管或微孔板，如八联管等。此外，要佩戴好手套、口罩等防护用品，避免污染样本和自身暴露于潜在危险中。

　　二、样本处理与加样

　　1. 样本预处理：对于不同类型的样本，处理方法有所不同。例如拭子类样本，采样后需将拭子放入采样液中，通过搅拌和按压管壁提取核酸，然后弃去拭子；液体类样本则直接取一定量加入采样液中。之后充分混匀，可选择涡旋振荡器或手动方式，再进行瞬时离心消除气泡，静置片刻使核酸充分释放。

　　2. 配制反应体系：按照试剂盒说明书要求，在反应管中依次加入预混好的扩增反应液、引物探针混合物(若未包含在预混液中)以及处理好的核酸模板。轻柔混匀，避免产生气泡，盖紧管盖后可短暂离心或用移液器轻柔吹打。每一步加样都要注意更换吸头，防止交叉污染。

　　三、仪器操作

　　1. 开机预热：接通电源，按下仪器电源开关，启动等温扩增荧光检测仪。部分仪器可能需要先进行自检程序，确保各部件正常运行。然后根据实验需求设置合适的反应温度、时间及荧光检测通道等参数。一般来说，反应温度会根据不同的检测方法有所差异，如LAMP常用约60-65°C，RPA用37-42°C；反应时间通常为10-60分钟不等。保存设置好的程序以便后续使用。

　　2. 装载反应管：将配制好的反应管小心放入仪器的样本槽/孔位中，确保放置到位且位置正确。有些仪器可能要求孔位排满或按特定顺序放置。

　　3. 运行检测：确认反应管装载正确、程序设置无误后，点击“开始”或“运行”按钮启动检测程序。仪器会自动升温至设定温度并维持恒温，同时按照设定间隔进行实时荧光扫描，记录每个反应管在选定通道内的荧光信号值。在运行过程中，可通过仪器屏幕实时监控荧光信号强度曲线图，初步观察信号是否增长。

　　四、结果分析与判断

　　1. 结果生成：当设定的反应时间结束后，仪器会自动停止加热和检测。软件会根据收集到的荧光信号数据进行分析计算，绘制扩增曲线，并以时间为横轴，荧光强度(或其变化值)为纵轴展示出来。

　　2. 阈值设定：软件通常会预设一个荧光强度阈值线(或在特定循环数设定阈值)，用于判断阴阳性结果。也可根据实际情况手动调整阈值。

　　3. 结果判定：阳性结果表现为荧光信号曲线呈现明显的“S”形上升，即荧光强度显著增加并超过阈值；阴性结果则是曲线平坦，始终未超过阈值线，无显著上升趋势；若设置了内标且未扩增，则表明反应失败或加样错误，结果可能无效。

　　五、日常维护与保养

　　1. 存放环境：长期不使用时，应将电池充电至50%左右，并定期检查电量情况。仪器应存放在干燥、通风良好的地方，远离水源、热源及强磁场等不利因素。建议湿度保持在<60%，温度控制在18-25℃之间。

　　2. 清洁维护：表面清洁可用软布蘸清水或70%酒精擦拭，避免直接喷射清洁剂以免损坏仪器表面涂层；每三个月左右需用吹气球清除反应孔内的灰尘；若发生试剂泄漏等情况应及时用无尘布蘸酒精清洁干净；另外还要定期检查光学部件特别是荧光检测窗口是否干净无污渍影响信号传输效果。

　　3. 使用习惯：尽量避免频繁开关机操作，两次开关机间隔时间不少于30秒；每次实验结束后待模块冷却至室温再关机；即使长期不用的情况下也建议每隔半个月开机自检一次，每次持续约20分钟左右以确保仪器处于良好状态随时可以投入使用。